Efectos de la microvibración a 30 Hz sobre la expresión de IL-17 y RANKL en células osteoblásticas derivadas del cráneo y osteoclastos derivados de la médula ósea cultivadas in vitro

Abstract

Introducción: Se ha demostrado que utilizar el tratamiento de microvibración en pacientes con osteoporosis induce remodelación en la cortical externa del esqueleto, quizá debido a la inhibición de la actividad osteoclástica. Objetivo: Evaluar los efectos de la microvibración durante 20 minutos a 30 Hz en células osteoblásticas y osteoclásticas para determinar la expresión de IL-17 y RANKL. Material y métodos: Osteoblastos derivados del cráneo del ratón Balb/C fueron sembrados en cajas de 24 pozos de 1.5 cm (Gybco, EUA) en un medio de cultivo DMEM F-12 (ATCC, EUA) y osteoclastos derivados de células madre de la tibia de ratón fueron sembrados en cajas de 24 pozos de 1.5 cm en un medio de cultivo α-MEM (ATCC, EUA), adicionando 0.5 μL/mL de 1α, 25-dihidroxivitamina D3 (Sigma-Aldrich, EUA). Ambos medios de cultivo fueron suplementados con 10% de suero fetal bovino (Gybco, EUA), 1% de antibióticos y antimicóticos, en una incubadora de tejidos (NuAire, EUA) a una atmósfera de 5% de CO2 y 95% de airea una temperatura de 37 o C. Posteriormente, las células cultivadas se sometieron a microvibraciones (0.25 N; 30 Hz) con el aparato AcceleDent (Ortho Accel, EUA) durante 20 minutos. Antes y después de las microvibraciones se recolectaron 500 μL de sobrenadante de las células, el cual fue almacenado en un ultracongelador a -70 oC (Thermo, EUA) para posteriormente determinar la expresión de IL -17 y RANKL (Peprotech, Rocky Hill, NJ, EUA) por medio del ensayo de ELISA. Resultados: La microvibración mostró una sobrerregulación estadísticamente significativa en la alteración de IL-17 tanto en los cultivos de osteoblastos como el de los osteoclastos comparada con el grupo control. Sin embargo, en los osteoclastos y osteoblastos hubo una bajorregulación estadísticamente significativa de la expresión de RANKL comparada con el grupo control. Conclusión: El estudio demostró que tanto osteoblastos como osteoclastos cultivados in vitro sometidos a microvibración de 30 Hz durante 20 minutos producen factores solubles relacionados con la maduración e inhibición osteoclástica